在大椎與肩峯連線中點，肩部筋肉處。
坐位。先確定大椎穴與肩峯最高點（肩部最高骨）的位置，再取兩者連線的中點，在兩筋之間，按壓有明顯酸脹感處即爲此穴。
有斜方肌、肩胛提肌；淺層布有鎖骨上神經及頸淺動、靜脈的分支或屬支；深層有頸橫動、靜脈或屬支和肩胛背神經的分支。
肩井穴配足三裏穴、陽陵泉穴治腳氣痠痛；治療乳腺炎特效穴。
肩井穴配肩髃穴、天宗穴，有活血通絡止痛的作用，主治肩背痹痛。
肩井穴配乳根穴、少澤穴，有消炎通乳止痛的作用，主治乳汁不足，乳癰。
肩井穴配合谷穴，三陰交穴，有活血利氣催胎的作用，主治難產。
相關論述
《備急千金要方》：難產，針兩肩井入一寸瀉之，須臾即分娩。
《鍼灸大成》：主中風，氣塞涎上不語，氣逆，婦人難產。
推拿手法：用兩手拇指與食指相對用力捏拿肩上大筋，稱拿肩井。
推拿次數：約捏拿5～10次。
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